聚丙稀銑胺凝膠電泳簡稱(PAGE),是一種新型首選技術(shù),很多人對它很陌生,接下來本文就給大家介紹一下聚丙烯酰胺凝膠電泳是如何工作的,主要用在哪里:
PAGE是一種技術(shù),根據(jù)蛋白質(zhì)等大分子的電泳遷移率(即分析物向相反電荷的電極移動的能力)來分離它們。在PAGE中,這由分子的電荷、大小(分子量)和形狀決定,分析物通過聚丙烯酰胺凝膠中形成的孔隙移動。
PAGE的基本原理是通過電流使分析物通過聚丙烯酰胺凝膠的孔隙來分離它們。為了實現(xiàn)這一目的,通過添加過硫酸銨(APS)使丙烯酰胺-雙丙烯酰胺混合物聚合(聚丙烯酰胺)。在四甲基乙二胺(TEMED)的催化下,該反應(yīng)形成了一個類似于網(wǎng)狀的結(jié)構(gòu),其中有孔隙,分析物可以通過它移動。
由于電泳過程中的電阻較小,較小的分子遷移得更快。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和電荷也影響遷移率。十二烷基硫酸鈉和聚丙烯酰胺消除了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和電荷的影響,蛋白質(zhì)根據(jù)多肽鏈的長度進行分離。較小的孔徑也會降低小蛋白質(zhì)在凝膠中移動的速度,提高它們的分辨率,防止它們在電流作用下迅速跑到緩沖液中。
廣泛用于法醫(yī)學(xué)、遺傳學(xué)、生物技術(shù)和分子生物學(xué)的技術(shù)。